Fluorescencinė in situ hibridizacija, norint diagnozuoti Dauno sindromą

Nauja technika, skirta diagnozuoti sindromą

FISH reiškia fluorescencinę in situ hibridizaciją. FISH testas arba FISH analizė, kaip kartais vadinama, yra gana nauja citogenetinė technologija, leidžianti citogenetininkui nustatyti, kiek konkrečios chromosomos egzempliorių yra, nenorindami atlikti visų kariotipo gamybos etapų. Pavyzdžiui, FISH analizė gali greitai pasakyti, kiek yra 21 skaičiaus chromosomų, tačiau ji negali pasakyti nieko apie šių chromosomų struktūrą.

Kaip tai veikia

FISH bandymai paprastai atliekami ta pačiais mėginiais, kaip kariotipas - kraujas, amniocitai arba chorioninis vulgaris. FISH bandymas atliekamas naudojant fluorescencinį zondą, kuris jungiasi prie tam tikrų specifinių chromosomų. Šie fluorescenciniai zondai yra pagaminti iš tam tikrų chromosomų, būdingų tam tikroms DNR, ir žymimi fluorescuojančiu dažikliu. FISH analizėje naudojamos ląstelės neturi būti auginamos arba kultivuojamos (tai gali užtrukti nuo 7 iki 10 dienų), todėl FISH analizės rezultatai yra daug greičiau nei kariotijos rezultatai.

Paprastai mėginys gaunamas ir siunčiamas į laboratoriją, o chromosomos išskirtos ant skaidrės. Tada zondai dedami ant skaidrės ir leidžiama hibridizuoti (arba rasti jų atitikmenį) maždaug 12 valandų. Kadangi zondai yra pagaminti iš DNR, jie susieja su "atitinkančia" jų konkrečios chromosomos DNR. Pavyzdžiui, zondas, pagamintas iš DNR, specifiškų chromosomai 21, susies su bet kuria esančia 21 chromosoma.

Po hibridizacijos (arba klijavimo) skaidrė tiriama specialiu mikroskopu, kuris gali matyti fluorescuojančius vaizdus. Skaičiuojant fluorescuojančių signalų skaičių, citogenetinis gali nustatyti, kiek konkrečioje chromosomos yra. Pavyzdžiui, žmogus be Dauno sindromo turės du fluorescuojančius signalus, atitinkančius jų du 21 chromosomos .

Asmuo su trisomija 21 turės tris fluorescuojančius signalus, atitinkančius jų tris skaičius 21 chromosomas. Paprastai citogenetai naudos zondus 13, 18, 21, X ir Y chromosoms. Tai yra chromosomos, kurios gali sukelti trisomijas žmonėms.

Dauno sindromo diagnozė

Nors tai neatsižvelgia į faktinę analizuojamų chromosomų struktūrą, FISH analizė gali pasakyti, kiek egzempliorių yra konkrečioje chromosomos. Dauno sindromu citogenetikas naudoja zondus 21 skaičiaus chromosomai. Jei po mikroskopu matomi trys liuminescenciniai signalai, tai yra Dauno sindromo diagnozė.

Kaip FISH testas skiriasi nuo kariotipo?

FISH analizė tik nurodo, kad yra tam tikrų chromosomų ir kiek jų yra. Pavyzdžiui, tipinė FISH analizė jums pasakys, kiek 13, 18, 21, X ir Y chromosomų yra amniono skysčio mėginyje. FISH analizė nesuteiks jums informacijos apie kiekvieną chromosomą, be to, ji nesuteiks jums informacijos apie faktinę chromosomų struktūrą.

Privalumai

Pagrindinis FISH analizės privalumas yra tai, kad jis gali greitai informuoti apie tam tikras chromosomas. Pavyzdžiui, per tris ar keturias dienas jis gali pasakyti, kiek kopijų gali būti 21 konkrečios asmens chromosomos.

Priešingai, tradicinis kariotipas gali užtrukti iki dviejų savaičių.

Trūkumai

Pagrindinis FISH analizės trūkumas, palyginti su kariotypingu, yra tai, kad FISH analizė suteikia jums mažiau informacijos apie visas tiriamas chromosomas. Pavyzdžiui, tipiškas prenatalinis FISH testas pasakys, kiek yra 13, 18, 21, X ir Y chromosomų (ty, ar yra dviejų ar trijų egzempliorių), tačiau nepateiks jums jokios informacijos apie bet kurią kitą chromosomą ar bet kokia informacija apie faktinę chromosomų struktūrą.

Ką paprašyti savo gydytojo

Bottom Line

FISH analizė teikia greitą, tačiau ribotą informaciją apie vaisiaus chromosomas. Labai gerai atsakyti į klausimą - "Ar mano kūdikiui trisomija 21?", Tačiau pateikiama ribota informacija apie kitus struktūrinius chromosomų anomalijos, pvz., Translokacijas ir ištrynimus.

Šaltiniai

Amerikos akušerių ir ginekologų kolegija (ACOG). Fetalinių chromosominių anomalijų tikrinimas. ACOG praktikos biuletenis, numeris 77, 2007 m. Sausio mėn.

Nacionalinis žmogaus genomo tyrimų institutas. Fluorescencinė in situ hibridizacija (FISH), 2008.