Fluorescencija In situ hibridizacija
Fluorescencija in situ hibridizacija (FISH) yra vienas iš kelių būdų, naudojamų ieškant ląstelių DNR, ieškant konkrečių genų ar genų dalių buvimo ar nebuvimo.
Daugelis skirtingų vėžio tipų yra susiję su žinomais genetiniais sutrikimais. Ir genetine prasme mes kalbame ne tik apie paveldimumą. Per visą gyvenimą ląstelės gali atsirasti klaidų, kai jos suskaidomos ir auga.
Tokiose ląstelėse gali kauptis DNR slopinimas, susijęs su vėžiu.
Kaip veikia Žuvis?
FISH - tai metodika, naudojanti fluorescencinius zondus specifiniams genams ar jų dalims aptikti (DNR seka). Medicinos centro laboratorijos darbuotojai ir onkologai naudoja FISH, kad padėtų įvertinti pacientus, kuriems gali būti vėžys, o kartais - stebėti pacientą, kuriam jau buvo diagnozuotas vėžys ir kuris buvo gydomas.
Žuvis gali būti atliekamas naudojant įvairius mėginių tipus pagal įtariamo vėžio vietą ir tipą: iš periferinio kraujo, iš kaulų čiulpų biopsijos arba iš limfmazgių biopsijos atsiradusių navikų ląstelių ir formalino fiksuoto parafino įterpto audinio (tai reiškia audinio pavyzdys, kuris yra apdorojamas laboratorijoje ir įterptas į vaško rūšį, todėl jis tampa griežtesnis, todėl jis gali būti supjaustytas į plonas dalis ir sumontuotas žiūrimui mikroskopu).
Ką reiškia raidės?
"H" FISH reiškia hibridizaciją.
Molekulinės hibridizacijos metu kaip zondas naudojama žymėta DNR ar RNR seka - jei norite, vizualizuokite raudoną "Lego" plytą. Zondas yra naudojamas norint rasti analogišką "Lego" plytą arba DNR seką biologiniame mėginyje.
Jūsų mėginio DNR yra kaip "Lego" plytų poliai, dauguma šių polių plytų neatitiks mūsų raudonojo zondo.
Ir visi jūsų plytos gerai tvarkomi į 23 plytų pylių poras - kiekviena krūva yra viena iš jūsų suporuotų homologinių chromosomų, daugiau ar mažiau. Skirtingai nuo "Lego" plytų, mūsų raudonas "Lego" zondas yra tvirtas magnetas ir randamas jo derinys, nereikalaujant rūšiuoti per krūvas.
"F" reiškia fluorescenciją. Mūsų raudonas zondas gali prarasti plytų polius, todėl jis bus paženklintas spalvotu fluorescuojančiu dažikliu, kad jis švytėtų. Kai ji nustato savo atitikimą tarp 23 susietų polių, fluorescuojanti žyma atskleidžia savo vietą. Taigi dabar jūs galite pamatyti, kaip mokslininkai ir klinicininkai gali naudoti FISH, kad padėtų nustatyti, kur (kokia krūva ar kokia chromosoma) konkrečiam žmogui yra tam tikras genas.
"I" ir "S" stovi vietoje . Tai reiškia, kad mūsų raudona "Lego" plyta ieško savo atitikimo jūsų pateiktame pavyzdyje .
Ką apie specifinius kraujo vėžio atvejus?
FISH ir kitos in situ hibridizacijos procedūros yra naudojamos diagnozuoti chromosomų anomalijų įvairovę - genetinės medžiagos pokyčius, chromosomų pokyčius, įskaitant:
Ištrynimas - dalis chromosomos praeina
Translokacija - dalis vieno chromosomos išsiskiria ir lieka ant kitos chromosomos
Inversija - chromosomos dalis suskaidoma ir vėl įdėta atgal, bet atvirkštine tvarka
Kopijavimas - chromosomos dalis yra per daug kopijų ląstelėje
Kiekvienas vėžio tipas gali turėti savo chromosomų pokyčių rinkinį ir atitinkamus zondus. Žuvis ne tik padeda nustatyti pradinius genetinius pokyčius ligos procese, pavyzdžiui, vėžio, bet taip pat gali būti naudojamas stebint atsaką į gydymą ir ligų remisiją.
FISH aptikti genetiniai pokyčiai kartais teikia papildomos informacijos apie tai, kaip gali elgtis žmogaus vėžys, remiantis tuo, kas praeityje buvo stebimas žmonėms su tokio paties tipo vėžiu ir panašiais genetiniais pokyčiais. Kartais FISH vartojamas po diagnozės nustatymo, kad būtų galima rinkti papildomą informaciją, kuri galėtų padėti numatyti paciento rezultatus ar geriausią gydymą.
FISH gali nustatyti chromosomų anomalijas leukemijose , įskaitant lėtinę limfocitinę leukemiją (LML). Dėl lėtinės limfocitinės leukemijos / mažos limfocitinės limfomos FISH leidžia pacientams išsiaiškinti jų progresyvinę kategoriją: gerą, vidutinį ar neturtingą. Ūminėje limfoblastinėje leukemijoje (ALL) leukeminių ląstelių genetika gali pasakyti apie vėžio rizikos lygį ir padėti priimti gydymo sprendimus.
Žuvų skydeliai taip pat gali būti naudojami limfomai, daugybinei mielomai, plazmos ląstelių proliferaciniams sutrikimams ir mielodisplazijos sindromui. Pavyzdžiui, mantijos ląstelių limfomos atveju yra translokacija, kurią FISH gali aptikti vadinamą GH / CCND1 t (11; 14), kuris dažnai yra susijęs su šia limfoma.
Kodėl FISH?
FISH pranašumas yra tai, kad jo nereikia atlikti ląstelėse, kurios aktyviai dalijasi. Citogenetiniai tyrimai paprastai trunka maždaug tris savaites, nes vėžio ląstelės turi būti auginamos laboratorinių induose maždaug 2 savaites, kol jos gali būti išbandytos. Priešingai, FISH rezultatai dažniausiai yra prieinami laboratorijoje per kelias dienas.
> Šaltiniai:
> Vėžinių citogenetinių tyrimų CPT kodai.
> Fluorescencinė in situ hibridizacija (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluorescencinė in situ hibridizacija (FISH). http://www.nature.com/scity/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD ir kt. Hematologinių sutrikimų fluorescencijos situacinio hibridizavimo tyrimai. Molekulinės diagnostikos žurnalas: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.